海能 K1100 全自動(dòng)凱氏定氮儀配合石墨爐消化和酸堿滴定測(cè)定植物含氮量操作規(guī)程
申明：此教程為本人依據(jù)使用經(jīng)驗(yàn)查閱及課題組已有的2018年編寫的植物氮含量測(cè)定規(guī)程等資料編寫，如有技術(shù)沖突以廠家官方為準(zhǔn)。 使用注意事項(xiàng)在使用教程中體現(xiàn)，不單獨(dú)列出。
1、本實(shí)驗(yàn)室儀器配置
1.1、海能 SH220N 石墨消解儀（消解樣品）
1.2 AT-710自動(dòng)酸堿滴定儀（標(biāo)定鹽酸濃度）
1.3、海能 K1100 全自動(dòng)凱氏定氮儀
2、操作流程（以測(cè)定藥用植物貝母中氮含量為例）
2.1樣品的消解
2.1.1 取 20 支消化管置管架上，其中16支用于樣品測(cè)定，精密稱取樣品0.5g（注意：因?yàn)橄芎荛L(zhǎng)，避免樣品粘壁，所以可以考慮把樣品連同稱量紙一起放入消化管中，稱量紙中含氮N量很低，還有專門適用于消化中使用的低氮稱量紙或稱量船可以考慮），加入濃硫酸10ml（硫酸加入后溶液變黑色，樣品開(kāi)始碳化），加入硫酸銅：硫酸鉀=1:15 的混合物 6.4g；2支不加樣品，同樣加入硫酸和硫酸銅硫酸鉀的混合物作為空白對(duì)照，2支精密稱取0.1g的硫酸銨試劑（含氮量為21.2%），用于監(jiān)測(cè)儀器測(cè)定的穩(wěn)定性如何。
2.1.2 消化管上加小漏斗，便于回流。
2.1.3 消化時(shí)溫度逐步上升，150-180℃，15min；240-280℃，30min；380-410℃，90min(各個(gè)物種可能有差異，可以調(diào)整)。
2.1.4 消解完成為淡藍(lán)綠色澄清液（如還有少量黑色固體物質(zhì)說(shuō)明消化沒(méi)完全，還要繼續(xù)消解），并冷卻至常溫。
2.2 測(cè)定前的試劑配制
2.1.1 混合指示劑： 分別配置1份溶解于95%乙醇的0.1%甲基紅乙醇溶液（1g/L）與5份溶解于 95%乙醇的 0.1%溴甲酚綠乙醇溶液（1g/L），臨用時(shí)才混合。注意：甲基紅難溶，可以超聲+60℃熱水浴促進(jìn)溶解。
2.1.2 硼酸溶液（20g/L）：精密稱取20g的硼酸，用蒸餾水溶解并定容至1000ml，按 100:1 比例加入甲基紅—溴甲酚綠混合指示劑，混合均勻。
2.1.3 氫氧化鈉溶液（400g/L）：稱取 400g 氫氧化鈉，用蒸餾水溶解并定容1000ml。注意：氫氧化鈉要?jiǎng)×曳艧?，因此溶解氫氧化鈉時(shí)可考慮冷水浴或冰水浴，待溶液完全冷卻之后（一般＞1小時(shí)）再定容至1000ml。
2.1.4 鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液[C(HCL)=0.1000mol/L] ：10ml移液管移取8.4ml 濃鹽酸（鹽酸濃度36%-38%），然后用蒸餾水定容至1000ml容量瓶中，并進(jìn)行標(biāo)定。本次標(biāo)定采用了AT-710自動(dòng)酸堿滴定儀：
A、儀器首先設(shè)定一個(gè)滴定方法，程序里設(shè)定滴定終點(diǎn)為pH=3.89(這個(gè)終點(diǎn)是怎么確定的呢，具體就是酸堿中和的化學(xué)原理了，可以自己搜索一下，之前看過(guò)麥田的風(fēng)寫的關(guān)于鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定的博客還挺詳細(xì)的)。
B 先往白色大瓶中加入鹽酸溶液，然后purge讓整個(gè)系統(tǒng)里充滿鹽酸，具體如下
C然后再在燒杯中加入碳酸鈉溶液（最好加入剛才配置的甲基紅和溴甲酚綠的混合指示劑，可以肉眼判斷一下AT-710滴定的準(zhǔn)不準(zhǔn)，雙重保險(xiǎn)嘛）。
碳酸鈉溶液配置參考“GBT601-2016化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備”中對(duì)鹽酸的標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備，基本原理就是1摩爾的碳酸鈉消耗2摩爾的鹽酸?？蓞⒖嘉覄偛耪f(shuō)的pH確定的那篇博客，寫的非常詳細(xì)。但需要注意的一點(diǎn)就是，國(guó)標(biāo)中要標(biāo)定0.1mol/L的鹽酸用到的工作基準(zhǔn)試劑無(wú)水碳酸鈉的質(zhì)量是0.2g（實(shí)在沒(méi)有用優(yōu)級(jí)純代替，但別用分析純的無(wú)水碳酸鈉，純度達(dá)不到，還有就是碳酸鈉要先高溫干燥一下）。
D、回到最初始界面，是你的方法，然后就可以開(kāi)始滴定（如下圖）。注意滴定中，磁力攪拌子不要碰到溫度傳感器和pH傳感器。滴定完成后機(jī)器自動(dòng)停止滴定，界面會(huì)自動(dòng)顯示HCl滴定的體積。然后就可以自己算一下HCl濃度是多少了。
E、最后，要按照purge的程序?qū)⑾到y(tǒng)中的溶液全部purge出系統(tǒng)，Ph感應(yīng)頭這端用純凈水清洗后保存在3M的KCl中，即可關(guān)機(jī)。
2.3 海能全自動(dòng)定氮儀的操作
2.3.1 開(kāi)機(jī)前先打開(kāi)冷凝水閥（左側(cè)接水管的水龍頭）,換上實(shí)驗(yàn)溶液，打開(kāi)電源。注意：氫氧化鈉溶液可以放置幾天，硼酸溶液建議當(dāng)天用當(dāng)天配置，鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液第二天用建議避光冷藏保存（因?yàn)辂}酸有揮發(fā)性）。
2.3.2 堿管路溶液置換，依次點(diǎn)擊：調(diào)試一堿閥—堿泵打開(kāi)，待堿管路全部置換為實(shí)驗(yàn)試劑后(大概10秒),依次點(diǎn)擊:堿泵一堿閥關(guān)閉。（注意：順序不能顛倒，否則會(huì)造成儀器壞。）
2.3.3 硼酸管路溶液置換，依次點(diǎn)擊：接收杯排廢閥一排水泵一硼酸泵打開(kāi),待硼酸管路全部置換為實(shí)驗(yàn)試劑后(大概15 秒），依次點(diǎn)擊：硼酸泵—排水泵—接收杯排廢閥關(guān)閉。(注意：順序不能顛倒,否則會(huì)造成儀器損壞。)
2.3.4 清洗，其中“換酸清洗“最重要，每天換酸都要清洗，建議4次。
2.3.5儀器預(yù)熱 取空白試管一支,上機(jī),依次點(diǎn)擊:測(cè)試一自動(dòng)測(cè)試—常規(guī)測(cè)試。輸入標(biāo)定后的標(biāo)準(zhǔn)酸濃度，空白體積設(shè)置為0,硼酸設(shè)置為15ml,稀釋水設(shè)置為10ml,堿液設(shè)置為0,蒸餾時(shí)間設(shè)置為5分鐘。點(diǎn)擊確定,開(kāi)始預(yù)熱。預(yù)熱3次,三次滴定體積之差小于0.05ml（貝母樣品測(cè)定時(shí)預(yù)熱時(shí)滴定體積分別是0.124ml、0.0760ml、0.132ml）,說(shuō)明預(yù)熱完成。樣品與樣品之間不用清洗。
2.3.6空白樣的測(cè)定 將消解時(shí)設(shè)置的空白對(duì)照上機(jī),測(cè)定。樣品重量設(shè)置為0,標(biāo)準(zhǔn)酸濃度設(shè)置為標(biāo)定的濃度,空白體積設(shè)置為0,硼酸設(shè)置為15ml,稀釋水設(shè)置為10ml,堿液設(shè)置為40ml,蒸餾時(shí)間設(shè)置為5min。將兩次的樣空白的滴定體積取均值作為樣品的空白體積（貝母測(cè)定時(shí)空白體積分別為0.12ml和0.115ml）。
2.3.7樣品的測(cè)定 樣品重量設(shè)置為0.5xxx(你自己樣品的具體重量，注意2個(gè)硫酸銨樣的重量是0.1g),標(biāo)準(zhǔn)酸濃度設(shè)置為標(biāo)定的濃度,空白體積設(shè)置為測(cè)定出的空白體積,硼酸設(shè)置為15ml,稀釋水設(shè)置為10ml,堿液設(shè)置為40ml,蒸餾時(shí)間設(shè)置為5min。點(diǎn)擊確定,儀器開(kāi)始自動(dòng)測(cè)定。（貝母一個(gè)樣品測(cè)定時(shí)間大概7min左右，測(cè)出含氮量平均2.5%）
2.3.8儀器清洗與保養(yǎng)
2.3.8.1取干凈消化管加一半蒸餾水,上機(jī)空蒸,重復(fù)3次?？照艟褪牵簶?biāo)準(zhǔn)酸濃度設(shè)置為標(biāo)定的濃度,空白體積設(shè)置為測(cè)定出的空白體積,硼酸設(shè)置為15ml,稀釋水設(shè)置為0ml,堿液設(shè)置為0ml,蒸餾時(shí)間設(shè)置為5min。
2.3.8.2然后將所有試劑全部換為蒸餾水（滴定酸不用換) ,依次點(diǎn)擊:調(diào)試一堿閥一堿泵打開(kāi);依次點(diǎn)擊:堿泵一堿閥關(guān)閉(每次大概10秒,重復(fù)2-3次)。依次點(diǎn)擊:接收杯排廢閥—排水泵一硼酸泵打開(kāi)，依次點(diǎn)擊：硼酸泵—排水泵一接收杯排廢閥關(guān)閉(大概15秒,重復(fù)2-3 次) 。(注意:順序不能顛倒,否則會(huì)造成儀器損壞。)
2.3.8.3關(guān)閉電源,關(guān)閉冷凝水閥,并用濕布將儀器表面污漬擦拭干凈。
2.3.8.4若長(zhǎng)時(shí)間不使用(超過(guò)1周),需用醋酸清洗,將消化管加一半醋酸（不用稀釋），空蒸 2 次，然后用蒸餾水空蒸3次,確保沒(méi)有醋酸殘留。
