最近有小伙伴問我：條帶背景干干凈凈的，怎么突然冒了一堆黑點？ 其實大多數(shù)情況都來自這幾個地方?? ① 封閉液溶解不完全 / 放太久 ② 膜操作中干過 ③ 抗體稀釋液里有微小雜質(zhì)...
IP屬地：天津
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WB 條帶莫名其妙冒黑點？ -
WB 轉(zhuǎn)膜失敗常見原因分析
? 1. 轉(zhuǎn)膜不完全 電壓/電流不足，轉(zhuǎn)膜時間太短 膠和膜之間有氣泡沒貼緊 轉(zhuǎn)移緩沖液太舊 or 配比錯誤 ? 2. 蛋白遷移過度 電壓太高 or 時間太長，小分子蛋白直接穿...
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報恩內(nèi)參上線！這條帶真懂科研人的心??
別的不說，這條帶真的太爭氣了～ 背景干凈、顯色均勻，堪稱“實驗界的報恩劇主角”。 做WB那么久，終于等到這一天?? 感謝客戶實拍結(jié)果，這清晰度我愿稱之為神圖。
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WB條帶太淡？八個可能的原因都在這??
1) 上樣量不足 為什么：起始蛋白量太低，目標(biāo)蛋白信號自然弱或不可見。 怎么做（概念）：增加每孔上樣的總蛋白量，或使用更富集的樣品（見第7項）。同時保持上下樣一致以便對比。 ...
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WB不再盲轉(zhuǎn)！這一步幫你快速判斷
有時候WB跑完電泳，總是擔(dān)心上樣不均、條帶跑飛？ 別急著轉(zhuǎn)膜！ 這一步——轉(zhuǎn)膜前的蛋白染色，真的能救命！ 用了【X-UltraStain 蛋白染色液】， 電泳后直接染膠，幾分...
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科研人邪修秘籍：內(nèi)參15分鐘顯影別問了，問就是邪修。 用極速內(nèi)參染色液，15分鐘就能看到內(nèi)參條帶， 效率快到讓人懷疑是不是走火入魔了?? 實驗避坑 + 節(jié)省時間，科研邪修人必備法寶～
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WB 轉(zhuǎn)膜失敗常見原因分析轉(zhuǎn)膜不完全 電流/電壓不足，轉(zhuǎn)膜時間過短 膜和膠貼合不緊密，出現(xiàn)氣泡 轉(zhuǎn)移體系緩沖液不夠新鮮或配比錯誤 蛋白遷移過度 電壓過高，時間過長，導(dǎo)致小分子蛋白直接穿透膜 膜的選擇不...
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說出你的WB疑難問題，獲得限量特色體驗裝！
寶子，你是不是也有這樣的經(jīng)歷： ?? 師兄畢業(yè)了，沒人帶 ?? 條帶不對，做了又做 ??♀? 問題一堆，實驗室也沒人知道為什么 ?? 大幾千的試劑+幾個月的時間就打水漂…… 其實你不...
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提了一整天蛋白，濃度只有0.2 mg/ml？
有同學(xué)分享說：辛辛苦苦提了一整天蛋白，結(jié)果濃度只有 0.2 mg/ml ——真的瞬間心態(tài)崩塌?? 這種情況其實在實驗室里很常見： 蛋白濃度低，跑不出清晰條帶 后續(xù)實驗推進不了，...
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做 WB 的人應(yīng)該都懂這個痛點
小分子蛋白（20 kD 左右） → 跑得快，容易穿膜跑掉 大分子蛋白（180 kD 左右） → 跑得慢，不加時間根本轉(zhuǎn)不全 兩種蛋白要同時轉(zhuǎn)好？ 很多人的解決辦法是——切膜、...
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內(nèi)參到底怎么選,看這里做 WB，選對內(nèi)參很關(guān)鍵，不同細胞結(jié)構(gòu)、實驗條件適合的內(nèi)參不一樣。 細胞質(zhì)常用內(nèi)參 β-actin（42 kDa）：多數(shù)細胞和組織通用，但對低溫、刺激敏感，分裂期可能不穩(wěn)定 ...
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做WB最怕的不是跑膠，是轉(zhuǎn)膜??做WB最怕的不是跑膠，是轉(zhuǎn)膜?? 做WB最怕轉(zhuǎn)膜那一步 夏天抱著冰盒還得算電流時間，轉(zhuǎn)得我心態(tài)炸裂?? 后來試了免冰浴轉(zhuǎn)膜，真的輕松一大半?? ?? 轉(zhuǎn)膜液怎么配？ 電泳液800mL...
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WB實驗 | Marker曝光太亮了？是抗體“瞄錯了” 每次做WB，marker亮得離譜，甚至蓋過目標(biāo)條帶???? ??直接原因其實很簡單：抗體和marker的非特異性結(jié)合太強了！ 這時候別只怪顯影，其實問題多半出在這...
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WB不重跑，膜不浪費｜整膜檢測我用這一招最近開始做整膜檢測，想一張膜測多個蛋白。 換膜太麻煩，封閉又費時間。后來試了 X-Strip 高效剝離液，真不錯。 ?一抗、二抗剝得干凈 ?蛋白不掉，剝了5次條帶還穩(wěn) ?不用...
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蛋白太脆弱？一上樣就飄？別怕，有它就穩(wěn)得一批！ ????Loading一加，蛋白立刻乖乖下沉～ 不飄、不糊、不降解，且不含劇毒的B-巰基乙醇 像給蛋白上了安全帶???? 絲滑到底，跑膠順到起飛！ 搞科研的快...
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WB蛋白提取，推薦這款懶人神器！做WB實驗時是不是總覺得配裂解液太麻煩？ 我最近用上了艾克生命 X-RIPA UltraMix 預(yù)混裂解液，真的太省事了！ ??來看圖對比?? 傳統(tǒng)方案需要買三種試劑，混配+超聲...
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提蛋白總是黏糊糊的，是我哪里做錯了嗎？最近在做蛋白提取，發(fā)現(xiàn)裂解完總有一坨像鼻涕一樣的東西，一開始以為是哪里污染了， 原來基因組在細胞里是卷起來的（超螺旋結(jié)構(gòu)），本是溶在液體里的。但如果裂解條件太強，比如用了太“...
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高效剝離液，快速去除抗體，輕松重復(fù)使用膜
? 高效剝離液，快速去除抗體，輕松重復(fù)使用膜！ ? Western Blot實驗中，如何高效去除已經(jīng)結(jié)合的抗體，進行膜再生，整膜孵育怎么破？這款 艾克生命高效剝離液，專為你的...