血友病作為一種遺傳性出血疾病，主要分為兩種類型，一種是血友病A型，即缺失凝血因子VIII，另一種是血友病B型，即缺失凝血因子IX。兩者皆為X染色體隱形遺傳，大部分患者為男性，女性一般不發(fā)病，有些攜帶致病基因的女性也會有輕微癥狀，常見的臨床癥狀表現(xiàn)為關(guān)節(jié)和肌肉內(nèi)出血。目前，傳統(tǒng)治療手段為凝血因子替換療法，凝血因子來源為重組蛋白或從血漿中提取的凝血蛋白，可起到預(yù)防作用并治療急性血友病。但是血友病作為一種遺傳疾病，必須通過及基因治療才能根治。目前在研的基因療法試圖恢復(fù)患者內(nèi)源性凝血基因IX（FIX）和凝血基因VIII（FVIII）的表達(dá)，如利用腺病毒（AVV）載體幫助患者恢復(fù)肝細(xì)胞表達(dá)缺失的FVIII，但該療法可能激活患者體內(nèi)對AVV載體的免疫反應(yīng)，常使用糖皮質(zhì)激素作為免疫抑制劑改善治療效果。近期，一項(xiàng)發(fā)表在《THE LANCET Haematology》的研究首次針對血友病B患者開展AVV肝導(dǎo)向基因治療，驗(yàn)證新型AVV載體BBM-H901在治療血友病B方面具有良好安全性和長期有效性。
研究招募了符合條件的10例的血友病B型患者，服用糖皮質(zhì)激素一周后，在1小時內(nèi)接受靜脈注射5×1012vg/kg BBM-H901，并于2019年10月至2021年1月期間完成中位58周隨訪記錄
研究數(shù)據(jù)顯示，注射BBM-H901載體后衍生的FIX基因活性（FIX:C）平均值為36.9IU/dL，招募的前三名患者的FIX:C平均值為33.6 IU/dL。BBM-H901 輸注 1 周后，載體衍生的 FIX:C 迅速達(dá)到平均值 57·1 IU/dL，輸注5周后，F(xiàn)IX:C近峰值，平均值64·1 IU/dL。圖B顯示，在注射后1天，就可以檢測到FIX表達(dá)，圖C顯示，在注射后的24小時內(nèi)，血漿中載體迅速脫落，在隨訪中發(fā)現(xiàn)28天后血漿和唾液中檢測不到載體DNA，56天后精液中檢測不到載體DNA。圖D-F顯示BBM-H901載體為患者提供顯著臨床獲益，注射前后，患者的中位靶向關(guān)節(jié)數(shù)由1.5個降至0個，中位年化出血率由12次降至0次，中位FIX藥物輸注次數(shù)由53.5次降至0次。
在整個研究過程中，只在兩名患者中出現(xiàn)血清轉(zhuǎn)氨酶ALT和AST含量升高現(xiàn)象。研究進(jìn)一步顯示，ALT和AST變化主要發(fā)生在8-10周（已停用糖皮質(zhì)激素）并與FIX活性呈負(fù)相關(guān)，但在ALT和AST升高的患者中，用IFN-γELISpot法檢測AAV-衣殼特異性T細(xì)胞結(jié)果均為陰性，可能是AVV的特異性 T 細(xì)胞較少或者ELISpot 檢測的靈敏度較低導(dǎo)致。
研究還討論了預(yù)先服用糖皮質(zhì)激素在免疫抑制方面的作用。服用糖皮質(zhì)激素后，對T細(xì)胞亞群進(jìn)行單細(xì)胞RNA測序，比較了FIX:C活性滿意組和活性較差組患者細(xì)胞毒性 T 細(xì)胞的免疫學(xué)狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞毒性T 細(xì)胞可能是導(dǎo)致活性較差的主要因素，糖皮質(zhì)激素可以抑制免疫反應(yīng)，促進(jìn)Treg活化，抑制抗原呈遞APC 的能力，降低CD16 +單核細(xì)胞和T 細(xì)胞亞群細(xì)胞間通訊能力。
在整個1期研究中，評估了 BBM-H901（一種基于 AAV 的基因治療載體）在血友病B類患者中的耐受性和安全性。實(shí)驗(yàn)中創(chuàng)新之處有二，首先是采用了BBM-H901新型載體，該載體融合了靶向肝臟的AAV衣殼和創(chuàng)新性表達(dá)盒，使藥物可以高效感染肝細(xì)胞；其次，研究在BBM-H901注射前 7 天讓患者預(yù)先口服糖皮質(zhì)激素，除了起到免疫抑制作用，還有助于盡早發(fā)現(xiàn)患者由基因治療引發(fā)的血清轉(zhuǎn)氨酶ALT和AST表達(dá)量升高。雖然這項(xiàng)研究提供了 BBM-H901 的安全耐受性和活性的數(shù)據(jù)，但研究的時間相對較短，長期臨床益處在未來幾年內(nèi)仍有待監(jiān)測。即便如此，BBM-H901基因治療治愈血友病作為亞洲首個基因治療藥物臨床研究成果也為其他全身遞送的罕見病基因治療藥物研發(fā)提供了重要參考。
參考文獻(xiàn)：【1】Xue F, Li H, Wu X.el Safety and activity of an engineered, liver-tropic adeno-associated virus vector expressing a hyperactive Padua factor IX administered with prophylactic glucocorticoids in patients with haemophilia B: a single-centre, single-arm, phase 1, pilot trial. Lancet Haematol. 2022 May 19:S2352-3026(22)00113-2. doi: 10.1016/S2352-3026(22)00113-2. Epub ahead of print. PMID: 35598604.
