(1)15ml菌液(接種40ul菌種),采用四個(gè)離心柱進(jìn)行質(zhì)?;厥?,每管回收80ul,合并為320ul(300ng/ul).
注意總量保持為至少20ug以上,否則很難回收到去內(nèi)毒素的質(zhì)粒
(2)5M NaCL(1/20總質(zhì)粒體系),本體系取16ul的NaCL溶液+1ml預(yù)冷后的無水乙醇,上下顛倒混勻,-20℃下,放置10min,12000rpm,4℃,離心13min。倒掉上清。該步驟要小心,不要把白色物質(zhì)離心丟掉。
(3)用75%的酒精500ul重旋質(zhì)粒,上下顛倒混勻,12000rpm,5min,4℃條件下離心棄上清,用槍頭小心吸凈EP管內(nèi)液體,置于超凈臺吹干,10-15min。
(4)120ul水振蕩,37℃10min,快甩1min。大約可以回收到800ng/ul。