求助:流式細胞儀檢測植物倍型遇到的一些問題

實驗制備單細胞核懸液所用的裂解液為文獻中查閱到的LB01、WPS、MODS,操作步驟也是常用的物理破碎裂解后過500目篩,且在100rpm和2000rpm下梯度離心,細胞核染色用的是40umol/L PI染料避光染色15min。流式細胞儀型號為BD Accuri C6,做出來的結果一直不理想,沒有明顯的細胞分區(qū),而且有時候雜質峰很多,大部分情況下沒有峰出現(xiàn)。下面的圖是出峰比較明顯的一次;我們的材料基因組大小為650mb,不知道這個出峰的峰值對不對。希望有做過這方面大佬來指點一下,什么樣的方法能有效的提出植物細胞核,文獻上的方法我都差不多試了一邊(除了用果膠酶和纖維素酶制備原生質體,后面打算用這種方法),但效果都不太好??靵砭染却蚬と税?!

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