一、準(zhǔn)備

????試劑A、試劑B

????蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（0.5 mg/mL）?

????96孔板、PBS（稀釋用）

二、步驟

（1）工作液

????試劑A：試劑B? =? 50:1 按需配置（1孔200μL，排槍加樣預(yù)多幾個孔）

（2）標(biāo)準(zhǔn)品

????1.2 mL蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液 + 一管蛋白標(biāo)準(zhǔn)? →? 25 mg/mL

????25 mg/mL? →? 0.5 mg/mL

（3）上樣

????a）標(biāo)準(zhǔn)品

表1 - 標(biāo)準(zhǔn)品上樣示意

????b）樣品

表2 - 樣品上樣示意

加樣完畢，37℃ 靜置20-30min

（4）檢測

????a）酶標(biāo)儀，562nm

圖1 - 酶標(biāo)儀測量OD值（加樣時記得標(biāo)記，這里方向反了...）

????b）Curveexpert 1.4 擬合直線（注意是直線，BCA法為直線）

? ? ? ? X：OD值

? ? ? ? Y：標(biāo)準(zhǔn)品濃度

圖2 - Curveexpert數(shù)據(jù)錄入

圖3 - 直線擬合入口

圖4 - 直線擬合結(jié)果（r>0.99才好）

圖5 - 快捷計算入口

? ? c）計算樣品濃度

圖6 - 計算樣品濃度（輸入OD值，Y值即為計算得到的濃度）