大腸桿菌感受態(tài)

1 DH5a菌株?

DH5a是一種常用于質(zhì)??寺〉木?。E.coli?DH5a在使用pUC系列質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)化時(shí),可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α-互補(bǔ)??捎糜谒{(lán)白斑篩選鑒別重組菌株。??

基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1??

2 BL21(DE3)?菌株??

該菌株用于高效表達(dá)克隆于含有噬菌體T7啟動(dòng)子的表達(dá)載體(如pET系列)的基因。T7噬菌體RNA聚合酶位于λ?噬菌體DE3區(qū),該區(qū)整合于BL21的染色體上。該菌適合表達(dá)非毒性蛋白。??

基因型:F-,ompT,?hsdS(rBB-mB-),gal,?dcm(DE3)??

3 BL21(DE3)?pLysS菌株??

該菌株含有質(zhì)粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表達(dá)T7溶菌酶的基因,能夠降低目的基因的背景表達(dá)水平,但不干擾目的蛋白的表達(dá)。該菌適合表達(dá)毒性蛋白和非毒性蛋白。??

基因型:F-,ompT?hsdS(rBB-mB-),gal,?dcm(DE3),pLysS?,Camr??

4 JM109菌株??

該菌株在使用pUC系列質(zhì)粒載體進(jìn)行DNA轉(zhuǎn)化或用M13?phage載體進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí),由于載體DNA產(chǎn)生的LacZa多肽和JM09編碼的LacZΔM15進(jìn)行α-互補(bǔ),從而顯示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鑒別重組體菌株??

基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]??

5 TOP10菌株??

該菌株適用于高效的DNA克隆和質(zhì)粒擴(kuò)增,能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定遺傳。??

基因型:F-?,mcrAΔ(mrr-hsd?RMS-mcrBC),?φ80?,lacZΔM15,△lacⅩ74,?recA1?,araΔ139Δ(ara-leu)7697,?galU?,galK?,rps,?(Strr)?endA1,?nupG??

6 HB101菌株??

該菌株遺傳性能穩(wěn)定,使用方便,適用于各種基因重組實(shí)驗(yàn)?

7 DB3.1菌株

DB3.1菌株基因組中整合有g(shù)yrA462基因,使得該菌株可耐受致死基因ccdB的表達(dá)產(chǎn)物,因此該菌株特別適用于含有ccdB基因的質(zhì)粒構(gòu)建、擴(kuò)繁;缺失核酸內(nèi)切酶 (endA1),提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量;該菌株具有鏈霉素抗性。本產(chǎn)品經(jīng)優(yōu)化的感受態(tài)制備工藝制備而成,使用pUC19質(zhì)粒DNA檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)1×109 cfu/μg。

8?Tsurbo菌株

TSurbo是細(xì)菌快速生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)化效率大于10? cfu/μg的化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞,涂板6.5 h即可見(jiàn)克隆,培養(yǎng)基中搖菌培養(yǎng)3~5 h即可小量提取質(zhì)粒。該菌株屬?于Trelief TM 5α超級(jí)感受態(tài)誘變株,具有T1噬菌體抗性,突變的?lacZM15基因產(chǎn)物與載體攜帶的β-半乳糖苷酶基因表達(dá)產(chǎn)物實(shí)現(xiàn)α互補(bǔ),加入laclq基因更嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目刂芁ac啟動(dòng)子的開(kāi)啟,極大的降低了藍(lán)白斑篩選中的假陽(yáng)性率,endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。

9 TSach1-T1菌株

TSach1-T1 是轉(zhuǎn)化效率大于10? cfu/mu;g快速生長(zhǎng)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞,涂板8-9h可見(jiàn)克隆?;蚪M缺失核酸內(nèi)切酶(endA),提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量,重組酶缺陷型(recA1398)減少插入片段的同源重組概率,保證了插入DNA的穩(wěn)定性,lacZ△M15的存在使TSach1-T1 可用于藍(lán)、白斑篩選,tonA突變賦予TSach1-T1菌株對(duì)于T1和T5噬菌體的抗性。使用pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率高達(dá)1.5X10? cfu/ug DNA。

10 DH10B菌株

DH10B菌?株?來(lái)?源?于?MC1061菌?株?,?缺?失?核?酸?內(nèi)?切?酶?(endA1),?提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量;重組酶缺?型?(recA1)減少插入片段的同源重組概率,保證了插入DNA的穩(wěn)?定性;mcrA、mcrBC及mrr基因突變使得DH10B菌株適合于克?隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤DNA;?80lacZ?M15的存在使得DH10B可用于藍(lán)白斑篩選實(shí)驗(yàn);rpsL賦予該菌株鏈霉素抗性。本產(chǎn)品經(jīng)優(yōu)化的感受態(tài)制備工藝制備而成,使用pUC19質(zhì)粒DNA檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)1×109 cfu/μg。

11 JM110菌株

JM110是dam、dcm甲基化功能缺失菌株,從該菌株提取的質(zhì)粒DNA序列中GATC、CCAGG、CCTGG不被甲基化修飾?,?因此可以被對(duì)dam、dcm甲?基?化?敏?感?的?內(nèi)?切?酶?切?割?。lacIqlacZ?M15的存在使得JM110可用于藍(lán)白斑篩選實(shí)驗(yàn);該菌株具有鏈霉素抗性。本制品經(jīng)優(yōu)化的感受態(tài)制備工藝制備而成?,?使用pUC19質(zhì)?粒?DNA檢?測(cè)?,?轉(zhuǎn)?化?效?率?可?達(dá)?108 cfu/μg。

12EPI300菌株

EPI300菌株基因組整合了突變的trfA基因,在未添加誘導(dǎo) 劑情況下,攜帶有oriV復(fù)制的質(zhì)粒拷貝數(shù)約1-2 copies/cell, 添加誘導(dǎo)劑L-阿拉伯糖情況下 , 質(zhì)??截悢?shù) 可增加到約 15~20 copies/cell, 因此該菌株特別適用于各種不穩(wěn)定DNA或毒性基因的克?。蝗笔Ш怂醿?nèi)切酶 (endA1),提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量;重組酶缺陷型(recA1)減少插入片段的同源重組概率,保證了插入DNA的穩(wěn)定性 ;mrr-hsdRMS- mcrBC基因缺陷使得EPI300適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA;?80dlacZ?M15使得EPI300可用于藍(lán)白斑篩選;rpsL賦予該菌株鏈霉素抗性。本產(chǎn)品經(jīng)優(yōu)化的感受態(tài)制備工藝制備而成,使用pUC19質(zhì)粒DNA檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)?5X108cfu/μg。

13 TSINGKE TSC-E06 BL21 Star(DE3) 菌株

BL21 Star (DE3)菌株來(lái)源于BL21 (DE3)菌株,感受態(tài)細(xì)胞內(nèi)含有rne131基因突變(編碼RNase E),RNase E是參與mRNA降解的核心酶之一,故該基因突變可顯著增強(qiáng)mRNA的穩(wěn)定性,從而提高異源蛋白產(chǎn)量。主要適用于低拷貝的T7啟動(dòng)子表達(dá)載體(如PET系列)的高水平蛋白表達(dá),同時(shí)含有大腸桿菌RNA聚合酶,也可用于非T7啟動(dòng)子表達(dá)載體(如pGEX系列)的蛋白表達(dá)。由于該菌株中mRNA穩(wěn)定性的提高,BL21 Star (DE3)具有更高的基本表達(dá),因此不適合表達(dá)毒性蛋白。本產(chǎn)品經(jīng)優(yōu)化的感受態(tài)制備工藝制備而成,使用pUC19質(zhì)粒DNA檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)1×108 cfu/μg。


14 Stbl3菌株

是收集生長(zhǎng)在對(duì)數(shù)期的Stbl3菌,加入含有甘油的細(xì)菌凍存液制備而成。可以直接劃平板或小量、大量培養(yǎng)。特別適合作為慢病毒(lentivirus)載體和其它逆轉(zhuǎn)錄病毒載體等含有重復(fù)序列的載體或其它較大并且不太穩(wěn)定的載體的宿主菌以進(jìn)行質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化、克隆和擴(kuò)增。大腸桿菌Stbl3菌株來(lái)源于HB101?E. coli?菌株,其基因組含有重組酶recA13突變,可以抑制長(zhǎng)片段末端重復(fù)區(qū)的重組,所以能有效轉(zhuǎn)化、克隆和擴(kuò)增含有重復(fù)序列的慢病毒載體和其它逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。本菌株非常穩(wěn)定,和常見(jiàn)的大抽桿菌菌株相比,對(duì)于慢病毒載體等較大質(zhì)?;蚱渌环€(wěn)定載體的轉(zhuǎn)化效率以及克隆和擴(kuò)增的穩(wěn)定性有顯著提高。Stbl3菌株的基因型:F-?mcrB mrr hsdS20 (rB-, mB-)?recA13?supE44?ara-14?galK2?lacY1?proA2rpsL20(StrR)?xyl-5λ-?leu mtl-1?endA1+。本菌株具有鏈霉素抗性,并且不能用于質(zhì)粒的藍(lán)白斑篩選。本菌株可以使用常規(guī)的LB培養(yǎng)基或SOC培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。

15 EPI400菌株

EPI400來(lái)源于EC100菌株,將EC100核基因中控制質(zhì)??截悢?shù)的pcnB基因刪除后引入一個(gè)誘導(dǎo)啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的pcnB基因,即是EPI100菌株。EPI400菌株可以降低質(zhì)粒的拷貝數(shù),特別適合于各種不穩(wěn)定DNA或毒性基因的克隆,在加入WDEPI-誘導(dǎo)劑 I?后又可以提高質(zhì)粒產(chǎn)量到正常狀態(tài)。[mcrA,Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)]基因型使EPI400菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA 。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。lacZΔM15?標(biāo)記的存在使EPI400可用于藍(lán)白斑篩選,tonA賦予其抗噬菌體T1和T5的能力,rpsL賦予其鏈霉素抗性。EPI400感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率可達(dá)5×107?cfu/μg DNA。

基因型:F-?mcrA?Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)?Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74?recA1?endA1?araD139?Δ(ara, leu)7697?galU?galK?λ-?rpsL(StrR)?nupG?trfA?tonA?pcnB4?dhfr

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