@凍春卷 奧奧,知道了,謝謝你,我們的質(zhì)粒不帶GFP,可能轉(zhuǎn)個(gè)會(huì)方便一些??
CRISPR-Cas9基因敲除sgRNA設(shè)計(jì)大佬說,我只說一次,你自己要記住以最火熱的p53為例 Step 1 先找p53基因序列 1. NCBI--輸入p53并選擇物種human:tumor protein p53 ...
@凍春卷 想請(qǐng)教一下你用流式篩選陽(yáng)性細(xì)胞是帶什么標(biāo)簽嗎還是?這個(gè)是普通的流式就可以做還是說對(duì)流式有什么特殊要求呀??
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@凍春卷 嘿嘿,我們實(shí)驗(yàn)室乃至我們學(xué)院目前沒有挑單克隆的儀器,所以都是用96孔板梯度稀釋來挑單克隆,但是存在一個(gè)問題就是有的孔里的細(xì)胞會(huì)死掉,有的孔里的單克隆不止一個(gè),只有極個(gè)別的孔里是單克隆,有時(shí)候一驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)是假陽(yáng)性,很崩潰,這個(gè)方法真的是耗時(shí)又費(fèi)力?
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@科研搬磚小白菜 我試過一次,先在蛋白水平進(jìn)行了檢測(cè),效率不太理想,無效的靶點(diǎn)會(huì)掩蓋掉有效的靶點(diǎn)導(dǎo)致KO成了knock down
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@凍春卷 好的,謝謝你,有不懂的了再請(qǐng)教你??
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@凍春卷 解釋的很專業(yè),感覺自己太弱智了,那我可以用混合pool同時(shí)去瞬轉(zhuǎn)同一皿293T讓其包裝產(chǎn)生病毒,是這個(gè)意思嗎
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謝謝,我還想請(qǐng)教一個(gè)問題,我可以將同一基因合成的不同靶點(diǎn)序列一起連到Cas9載體上嗎,然后再去包裝病毒感染目的細(xì)胞??
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想請(qǐng)教一下所有亞型共有區(qū)域那張圖在SnapGene中是打開就是這樣的嗎?我要研究的基因怎么打開在Map里和這個(gè)不太一樣呀,都不知道怎么分析這些亞型的共有外顯子??
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