一、物品準(zhǔn)備 HBSS(沒(méi)的話PBS湊合),1640空培,75%酒精(帶容器),70μm篩網(wǎng)+注射器手柄,離心管(4/10/50) 膠原酶IV(...
一、準(zhǔn)備 試劑A、試劑B 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品(0.5 mg/mL) 96孔板、PBS(稀釋用) 二、步驟 (1)工作液 試劑A:試劑B = 50:1 按...
【準(zhǔn)備】 試劑盒提前復(fù)溫rt 樣品(細(xì)胞上清為例):1000g,20min 【一】樣品準(zhǔn)備&配標(biāo)準(zhǔn)品 樣品離心時(shí)即可進(jìn)行,先準(zhǔn)備7個(gè)EP管(做好...
普通引物 和 qPCR引物 普通PCR引物:目的是獲得目的基因,對(duì)非特異性反應(yīng) 和 引物二聚體 要求不嚴(yán)格RT-PCR 引物:目的是讓目的基因按...
一、物品準(zhǔn)備 ① 帶蓋流式管(照紫外)② 抗體③ 冰盒 二、步驟 PBMC為例(離心參數(shù)不同) 【1】上樣管準(zhǔn)備 ① 輕吹,收集細(xì)胞離心 300...
逆轉(zhuǎn)錄完后 補(bǔ)加80μL 去離子水 → 20+80=100μL 【備注】若細(xì)胞量很少,RNA濃度<150不適用上述 計(jì)算工具,可全部加入 【補(bǔ)充...
一、物品準(zhǔn)備 ① 緩沖液(小分子室4℃冰箱,外用非無(wú)菌)② 流式管③ 抗體④ 冰盒 二、步驟 以PBMC為例 ① 輕吹,收集細(xì)胞離心 300g ...
Background knowledge PBMC(peripheral blood mononuclear cell),外周血單個(gè)核細(xì)胞,其主...
Day 1 【1】提蛋白 ① 超聲<7℃ 預(yù)冷,水浴鍋100℃ 預(yù)熱 ② 備物(?;衽?號(hào)冰箱: 上層 蛋白裂解液; 下層 Ck 100x, ...