原理：Trizol試劑是直接從細(xì)胞或組織中提取總RNA的試劑。在樣品裂解或勻漿過程中，Trizol能保持RNA的完整性。加入氯仿后離心，樣品分成...
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Trizol法提取總RNA的原理及注意事項
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菜鳥學(xué)習(xí)之旅(一)——無縫克隆(下)
這一部分我們就以人p53CDS區(qū)為目的基因片段和pUC19為載體為例，講解一下無縫克隆的具體操作流程。 一. 查找p53目的基因 1. 在N...
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菜鳥學(xué)習(xí)之旅(一)——無縫克隆(中)上一部分中介紹了最最基礎(chǔ)的PCR反應(yīng)和傳統(tǒng)分子克隆，包括內(nèi)切酶，連接酶，外切酶，PCR擴增，轉(zhuǎn)化等等是之后所有分子克隆的基礎(chǔ)。如果說限制性內(nèi)切酶...
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菜鳥學(xué)習(xí)之旅(一)——無縫克隆(上)
最近開始了分子生物學(xué)中質(zhì)粒設(shè)計和構(gòu)建實驗，其中設(shè)計到無縫連接克隆，正好借著這個機會溫故和知新，一只小菜鳥的學(xué)習(xí)之旅開始了。 一. 最最最基...
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如何快速了解新接觸的質(zhì)粒(六)
“會讀質(zhì)粒圖譜才能用好質(zhì)粒?！?前面介紹了質(zhì)粒圖譜中復(fù)制起點，啟動子，抗性基因和蛋白純化標(biāo)簽四個元件，在蛋白質(zhì)檢測過程中常會遇到不好買的目的蛋白...
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如何快速了解新接觸的質(zhì)粒(五)
“會讀質(zhì)粒圖才能用好質(zhì)粒?！?蛋白標(biāo)簽(protein tag)是利用DNA重組技術(shù)，將目的蛋白一起融合表達(dá)的一種多肽或蛋白，以便于蛋白的表達(dá)，...
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如何快速了解接觸的質(zhì)粒(四)
“會讀質(zhì)粒圖才能用好質(zhì)粒?！?前面部分稍微復(fù)雜一點的啟動子和復(fù)制子已經(jīng)大概介紹完了，后面會慢慢補充遺漏的小知識點，這一part是相對簡單但是對于...
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如何快速了解接觸的質(zhì)粒(三)“會讀質(zhì)粒圖譜才能用好質(zhì)粒?！?--啟動子 啟動子(promoter)顧名思義就是用來啟動目的基因表達(dá)的一段DNA序列，位于目的基因前端，本身不...
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如何快速了解新接觸的質(zhì)粒(一)
質(zhì)粒(plasmids)是常用的一種載體(Vecto)，是做分子相關(guān)領(lǐng)域永遠(yuǎn)無法躲避的一道難題，不管做分子克隆，蛋白表達(dá)，包裝病毒等等都需要用到...
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SnapGene簡單入手(四)
“SnapGene是構(gòu)建質(zhì)粒的利器?！?上次介紹了雙酶切克隆和TA克隆，這次介紹一種和TA克隆比較相似的TOPO克隆，唯一的區(qū)別就是TA克隆用的...
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