1.試劑配方
X-gluc基液配方(GUS染色緩沖液)（50mM PBS，pH7.0）：
50mM NaH2PO4
50mM Na2HPO4
10mM Na2EDTA
0.1% Triton-100
0.5mM K3[Fe(CN)6]
0.5mM K4[Fe(CN)6]
X-gluc貯存液：用DMSO配成20mM貯存液。
2.產(chǎn)品組分：
組分貨號名稱規(guī)格貯存
?X-gulc貯存液1ml-20℃
?GUS染色緩沖液50ml4℃
3.產(chǎn)品簡介：
gus(β-glucuronidase，β-D-葡萄糖苷酸酶)基因是目前常用的一種報告基因，其表達產(chǎn)物β-葡萄糖苷酸酶(GUS)是一種水解酶，能催化許多β-葡萄糖苷酯類物質(zhì)的水解，它可以將5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯（5-bromo-4-chloro-3-indolyl-glucronide，縮寫為X-Gluc）分解為藍色的物質(zhì)，其檢測方法簡單、快速、靈敏、穩(wěn)定，且背景活性低。因為絕大多數(shù)植物細胞內(nèi)不存在內(nèi)源的GUS活性，因此gus基因廣泛用作轉(zhuǎn)基因植物的報告基因，尤其是在研究外源基因瞬時表達的轉(zhuǎn)化實驗中廣泛應(yīng)用。
該試劑盒包含GUS染色的全部試劑，使用方便，只需將染色液和緩沖液按照比例混合即配成GUS染色液。該試劑盒可以配制50ml GUS染色液。
4.使用說明：
GUS染色液配制：
GUS染色濃縮液使用前用GUS 染色緩沖液稀釋50倍即配成GUS染色液。如0.1 ml?GUS染色濃縮液加入到5 ml GUS染色緩沖液中，即配成5ml GUS染色溶液。該染色溶液最好現(xiàn)用現(xiàn)配，短期貯存可以-20℃保存2-3天。
5.GUS染色步驟：
1.將準(zhǔn)備好的材料浸泡在GUS染色液中，于37℃保溫1小時至過夜。
2.葉片等綠色材料轉(zhuǎn)入70%乙醇中脫色2-3次，至陰性對照材料呈白色。
3.肉眼或顯微鏡下觀察，白色背景上的藍色小點即為GUS表達位點。
6.注意事項：
用于染色的植物材料的制備方法要因涉及的特定組織和器官的不同而異。例如，擬南芥的根、花和葉片以及煙草幼苗的根就可以不作任何預(yù)處理而直接染色。但是像煙草和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片（1-3mm）。當(dāng)操作大的組織和樣品時，可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細胞。
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